Основные принципы анализа и описания гистологического и цитологического препаратов и электронно-

Гистология — ПСБГПМУ, Лечебное дело

Общие принципы анализа гистологических и цитологических препаратов

Анализ препарата начинается не с узнавания ткани, а с оценки его качества и артефактов. Без этого этапа возможна грубая диагностическая ошибка.

Алгоритм описания светооптического препарата

1. Оценка качества препарата

• Толщина среза: Оптимальная 5–7 мкм. Слишком толстый срез — наложение структур, невозможность чёткой фокусировки.
• Целостность: Отсутствие разрывов, складок, двойных слоёв.
• Качество окраски: Равномерность, специфичность. Например, при окраске гематоксилин-эозином ядра должны быть сине-фиолетовые, цитоплазма — розовая.

2. Обзорная характеристика (малое увеличение, ×10–×40)

• Тип ткани: Эпителиальная, соединительная, мышечная, нервная.
• Органная и гистогенетическая принадлежность: Определяется по характерной архитектонике (многослойный эпителий кожи — дерма и сосочки; трабекулы и синусоиды печени; пучки кардиомиоцитов миокарда).
• Соотношение паренхимы и стромы: Преобладает паренхима (железы внутренней секреции) или строма (сухожилия, хрящи).
• Наличие полостей, просветов, сосочков, фолликулов — ключевые опознавательные признаки.

3. Детальное описание на большом увеличении (×400–×1000)

Клеточный состав (цитологический анализ):

• Ядро: Форма (округлая, овальная, палочковидная, бобовидная), размер, расположение (центральное, эксцентричное), рисунок хроматина (равномерный, глыбчатый, конденсированный у гетерохроматина), количество и размер ядрышек.
• Цитоплазма: Окраска (базофилия, оксифилия), грануляция (специфические гранулы в тучных клетках, эозинофилах), оптическая плотность (гомогенная, пенистая, вакуолизированная).
• Соотношение ядро/цитоплазма (яЦО): Важный показатель функциональной активности или злокачественности. Низкое яЦО (много цитоплазмы) — дифференцированная клетка; высокое яЦО — недифференцированная или опухолевая клетка.

Тканевые структуры (гистотопографический анализ):

• Расположение клеток: Пласты, тяжи, фолликулы, группы, диффузно.
• Взаимоотношение с сосудами: Капилляры фенестрированного или синусоидного типа.
• Стромальный компонент: Вид волокон (коллагеновые, эластические, ретикулярные) и клеток (фибробласты, макрофаги, адвентициальные клетки).
• Межклеточное вещество: Аморфное или волокнистое, базофильное (хрящ) или эозинофильное (костная).

> [!simple] Простыми словами:

> Сначала определяете, что за орган (печень, почка, сердце), оцениваете качество окраски. Затем смотрите, где основная «рабочая» ткань (паренхима), а где «каркас» (строма). После этого изучаете отдельные клетки: размер ядра, цвет цитоплазмы, есть ли включения. Сравниваете с нормой.

---

Принципы анализа электронно-микроскопических микрофотографий (ЭММ)

Электронная микроскопия даёт информацию об ультраструктуре (органеллы, клеточные мембраны, внеклеточный матрикс на уровне макромолекул).

Базовые требования к снимку

• Разрешение: Указано увеличение (например, ×8000, ×20000, ×50000). При малом увеличении видна общая ориентация; при высоком — детали органелл.
• Тип микроскопа: ТЭМ (трансмиссионный) — срез толщиной 50–100 нм, чёрно-белое изображение; СЭМ (сканирующий) — поверхность объёмная, трёхмерная.

Методика описания ЭММ

1. Первичная идентификация (обзор ×2000–×8000)

• Определяется клеточный тип по форме и размеру (например, энтероцит с микроворсинками; гепатоцит с обилием пероксисом; плазматическая клетка с развитой гранулярной ЭПС).
• Выявляется типичная архитектура (ацинус поджелудочной железы: базальная часть клетки заполнена гранулярной ЭПС, апикальная — зимогенными гранулами).

2. Оценка сохранности ультраструктуры

• Мембраны: Целостность, чёткость контуров. Набухание или разрушение митохондриальных крист — признак гипоксии или фиксационного повреждения.
• Органеллы: Выявление патологических изменений (гипертрофия гладкой ЭПС, дегрануляция гранулярной ЭПС, вакуолизация).

3. Детальное описание ключевых структур

Цитоплазма:

• Эндоплазматическая сеть (ЭПС): Тип (гранулярная с рибосомами — синтез белков на экспорт; агранулярная — синтез липидов, детоксикация). Количество цистерн, их расширение или редукция.
• Митохондрии: Количество, форма (овальные, палочковидные), протяжённость крист (ламиллярные, тубулярные). Плотность матрикса.
• Комплекс Гольджи: Количество диктиосом (стопок цистерн) с мелкими везикулами (транс- и цис-поверхность). Ориентация (полярность).
• Лизосомы: Размер, электронная плотность (первичные — плотные, вторичные — гетерогенные, фагосомы, остаточные тельца).
• Включения: Гликоген (розетки, β-частицы), липидные капли (не имеют мембраны, округлые), секреторные гранулы (мембранные, с плотным ядром).

Ядро:

• Кардиолемма: Двойная мембрана, поры (комплексы ядерной поры).
• Хроматин: Эухроматин (светлый, активный — транскрипция) и гетерохроматин (тёмный, конденсированный — неактивный). Распределение (кариолемма, ядрышко).
• Ядрышко: Размер, количество, структурные компоненты (фибриллярные центры, плотный фибриллярный компонент, гранулярный компонент — отражают активность синтеза рРНК).

Клеточные контакты:

• Плотные (zona occludens): Облитерация щелей между клетками (слияние мембран) — барьерная функция.
• Десмосомы (macula adherens): Утолщения мембран с электронно-плотными бляшками, к которым подходят тонофиламенты.
• Щелевые (gap junctions, нексусы): Щель 2 нм, видна периодичность — обеспечивают ионный обмен.

> [!example] Пример: ЭММ гепатоцита

> На снимке видны крупные митохондрии с ламиллярными кристами (оксифильный гепатоцит). Цитоплазма содержит многочисленные цистерны гладкой ЭПС (участие в метаболизме ксенобиотиков). Комплекс Гольджи гипертрофирован (активный синтез липопротеидов). Ядро содержит крупное ядрышко с чётко выраженным гранулярным компонентом (высокая активность транскрипции). Вывод: функционально активный гепатоцит в фазе биотрансформации.

---

Особенности анализа цитологических препаратов (мазки, отпечатки)

Цитология изучает отдельные клетки или их мелкие группы, без сохранения тканевой архитектоники.

Порядок описания цитограммы

1. Клеточность: Обилие клеток, их разброс, наличие синцитиев или скоплений.

2. Фоновый компонент: Элементы крови, слизь, некротический детрит (глыбки), кристаллы.

3. Характеристика клеточного атипизма:

• Размер и форма клетки: Плеоморфизм (значительная вариабельность).
• Ядерные атипии: Гиперхромия (интенсивное окрашивание), неровность контуров (вырезки, инвагинации), увеличение ядрышек, многорядность.
• Митотическая активность: Число и характер митозов (патологические — с трёхгрупповой метафазой).

4. Цитоплазматические признаки: Соотношение базо- и оксифилии, наличие вакуолей, фагоцитоза.

> [!simple] Простыми словами:

> В электронном микроскопе мы «лезем внутрь» клетки: видим, как устроены её «заводы» (ЭПС, митохондрии), есть ли «бракованные детали» (лизосомы). В цитологии — смотрим только на отдельные клетки, оцениваем их «уродливость» (атипия) как признак рака.

---

> [!critical] Ключевой факт:

> Общий принцип анализа любого препарата — «от общего к частному»: сначала архитектоника (обзор), затем морфология клеток (детали), затем ультраструктура (ЭММ). Ошибка начинается с этапа идентификации артефактов.

---

Итог. Алгоритм описания гистологического препарата включает оценку качества, обзорное определение ткани и детальное описание клеток. Цитограммы анализируют на атипию ядра. ЭММ требуют идентификации органелл, их количества и состояния.

Все вопросы раздела: Подготовка к экзамену по Гистологии