Основные принципы анализа и описания гистологического и цитологического препаратов и электронно-

Гистология, эмбриология, цитология — ПСБГПМУ, Педиатрия

Основные принципы анализа и описания гистологического и цитологического препаратов и электронно-микроскопических микрофотографий

Введение. Цель анализа

Анализ гистологического, цитологического препарата или электронно-микроскопической микрофотографии представляет собой стандартизированную процедуру, направленную на идентификацию ткани, клеток и их функционального состояния на основе морфологических признаков. Алгоритм описания базируется на последовательном переходе от общего к частному, от макро- к микроструктуре.

Общие принципы описания

1. Систематичность – описание всегда идёт по плану: сначала обзор (малое увеличение), затем детали (большое увеличение).

2. Использование увеличения – первичное изучение при малом увеличении (обзорная характеристика), затем при большом (детальный клеточный состав).

3. Учёт метода окраски – от окраски зависит, какие структуры видны (например, гематоксилин-эозин даёт базофильные ядра и эозинофильную цитоплазму; импрегнация серебром выявляет ретикулярные волокна).

4. Сравнение с нормой – описывается не только структура, но и отмечаются отклонения (если есть).

Анализ светооптического гистологического препарата

1. Макроскопическая характеристика (малое увеличение, ×10–×40)

• Органная/тканевая принадлежность – на основе общей архитектоники (например, слоистость стенки пищеварительного тракта, дольки печени, канальцы почки).
• Тип среза – поперечный, продольный, косой, тангенциальный.
• Наличие капсулы – соединительнотканная оболочка, её толщина, наличие прослоек (трабекул, септ).
• Характер окраски – соотношение базофильных и эозинофильных зон.
• Сосуды – наличие крупных артерий, вен, капилляров; их расположение.

2. Микроскопическая характеристика (большое увеличение, ×100–×1000)

2.1. Эпителиальные ткани

• Тип эпителия (однослойный, многослойный, переходный, железистый).
• Количество слоёв, форма клеток (плоские, кубические, цилиндрические).
• Наличие базальной мембраны (видна при PAS-реакции или импрегнации; обычно не видна в гематоксилин-эозине).
• Специальные структуры: реснички, микроворсинки (щёточная кайма), кутикула.

2.2. Соединительная ткань

• Волокна: коллагеновые (розовые, толстые пучки), эластические (бледно-розовые, тонкие, извитые, окрашиваются орсеином), ретикулярные (импрегнация серебром – чёрные).
• Клетки: фибробласты (веретенообразные, ядра светлые), фиброциты, макрофаги, тучные клетки, плазматические клетки, лейкоциты.
• Основное вещество: в обычных препаратах не окрашивается (пустое пространство).

2.3. Мышечная ткань

• Гладкая: веретеновидные клетки с центральным ядром, без исчерченности.
• Поперечнополосатая скелетная: многоядерные волокна с периферическими ядрами, поперечная исчерченность (А- и I-диски).
• Поперечнополосатая сердечная: кардиомиоциты с центральными ядрами, анастомозы, вставочные диски.

2.4. Нервная ткань

• Нейроны: форма (пирамидные, звёздчатые, грушевидные), отростки (дендриты, аксоны), тигроид (базофильные глыбки в цитоплазме), ядро с крупным ядрышком.
• Глия: астроциты (отростки, «светлые» ядра), олигодендроциты (мелкие, тёмные ядра), микроглия.

2.5. Кровеносные сосуды

• Артерии: толстая мышечная оболочка, эластические мембраны.
• Вены: тонкая стенка, клапаны.
• Капилляры: однослойный эндотелий на базальной мембране.

2.6. Клеточный состав

• Для каждого типа клеток: форма, размеры, окраска ядра (базофильное, светлое, гетерохроматин/эухроматин), ядрышки, цитоплазма (гомогенная, зернистая, вакуолизированная), отношение ядро/цитоплазма.
• Наличие митозов или признаков апоптоза.

Анализ цитологического препарата (мазок, отпечаток, соскоб)

1. Общая характеристика препарата

• Клеточность – густая, умеренная, скудная.
• Фон – наличие эритроцитов, детрита, слизи, кристаллов.
• Группировка клеток – одиночно, скоплениями, пласты, розетки.

2. Описание клеточного состава

• Типы клеток – например, клетки плоского эпителия, железистые, воспалительные (нейтрофилы, лимфоциты, макрофаги), опухолевые.
• Морфометрия (размеры) – малые (<10 мкм), средние (10–20 мкм), крупные (>20 мкм).
• Форма – округлая, полигональная, веретеновидная, отростчатая.
• Ядро – расположение (центральное, эксцентричное), форма (круглое, овальное, неправильное), структура хроматина (равномерный, глыбчатый, рыхлый), наличие ядрышек.
• Цитоплазма – окраска (базофильная, эозинофильная, амфофильная), наличие включений (гранулы, вакуоли, пигмент), однородность.
• Ядерно-цитоплазматическое отношение (ЯЦО) – нормальное (≈1:4), повышенное (атипия).

3. Признаки атипии (для цитологической диагностики)

• Полиморфизм ядер и клеток.
• Гиперхромия ядра.
• Неровные контуры ядерной мембраны.
• Множественные ядрышки.
• Патологические митозы.

> [!example] Пример: мазок шейки матки по Папаниколау: нормальный плоский эпителий – клетки с пикнотическим ядром и эозинофильной цитоплазмой; при LSIL – койлоцитоз (перинуклеарный ободок), атипия.

Анализ электронно-микроскопической микрофотографии (ЭМ)

1. Определение типа микроскопии

• Трансмиссионная ЭМ (ТЭМ) – изображение ультратонких срезов в проходящем электронном пучке (двумерная картина, видны органеллы, мембраны, включения).
• Сканирующая ЭМ (СЭМ) – трёхмерная поверхность образца, рельеф (видны реснички, микроворсинки, поры).

2. Оценка ультраструктуры (ТЭМ)

• Клеточная мембрана – двойной контур, наличие гликокаликса, микроворсинок, инвагинаций, кавеол.
• Ядро – кариолемма с порами (диаметр около 90 нм), перинуклеарное пространство; хроматин: гетерохроматин (электронно-плотные глыбки) и эухроматин (светлые участки); ядрышко – фибриллярный центр и гранулярный компонент.
• Органеллы:
• Митохондрии: двойная мембрана, кристы (ламинарные, трубчатые), матрикс с гранулами.
• Эндоплазматическая сеть: гранулярная (шероховатая, с рибосомами) – цистерны с электронно-плотным содержимым; гладкая (агранулярная) – трубочки, везикулы.
• Аппарат Гольджи: стопки уплощённых цистерн, везикулы, секреторные гранулы.
• Лизосомы: однослойная мембрана, матрикс средней плотности, часто содержат остатки (вторичные лизосомы, остаточные тельца).
• Пероксисомы: однослойная мембрана, мелкозернистый матрикс, иногда кристаллоид (уратоксидаза).
• Включения: гликоген (электронно-прозрачные зёрна), липидные капли (гомогенные, без мембраны), секреторные гранулы (электронно-плотные со светлым ободком).
• Межклеточные контакты:
• Плотные (tight junctions) – слияние мембран.
• Десмосомы – утолщения мембран, тонофиламенты.
• Щелевые контакты (gap junctions) – шестиугольные коннексоны.
• Базальная мембрана – электронно-плотный слой (lamina densa) между клетками и соединительной тканью, толщина 30–60 нм.

3. Для СЭМ:

• Оценка трёхмерной формы клеток.
• Наличие микроворсинок (толщина 0,1–0,2 мкм, длина 1–2 мкм), ресничек (толщина 0,2 мкм, длина 5–10 мкм, сложная структура микротрубочек 9+2).
• Поверхностный гликокаликс не виден в стандартной СЭМ (требуется специальное окрашивание).

Заключение. Значение навыка

Умение последовательно описывать препараты лежит в основе морфологической диагностики. Студент должен владеть стандартным протоколом: органный/тканевой уровень → тканевой уровень → клеточный уровень → ультраструктурный уровень. Каждый этап требует учёта метода окраски, увеличения и фокусировки на специфических признаках.

> [!critical] Ключевой факт: универсальный алгоритм описания – «от общего к частному»: сначала макроструктура (обзор), затем микроструктура (детали), далее ультраструктура (при наличии ЭМ). Для любого препарата обязательно указывать тип окраски и ориентировку среза, а для цитологии – одиночные клетки и их ядерно-цитоплазматическое отношение. Для электронной микрофотографии ключевые признаки – мембранные органеллы и их характеристики (кристы, гранулы, везикулы).

---

Итог. Анализ гистологических, цитологических препаратов и ЭМ-микрофотографий выполняется по единой схеме: макроскопическая оценка (архитектоника, окраска) → микроскопия деталей (типы тканей, клеточный состав, ядерно-цитоплазматические особенности) → ультраструктурная верификация (органеллы, мембраны, контакты). Точное описание и идентификация структур являются основой понимания нормальной гистологии и патоморфологии.

Все вопросы раздела: Подготовка к экзамену по Гистологии, эмбриологии, цитологии